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CompTech EA 說明書

發(fā)布時間:2018/7/4點擊次數(shù):596

 

上海起發(fā)為complementtech一級經(jīng)銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research Technologies。Complement Technology繼續(xù)為世界各地的科學家提供高質(zhì)量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應用提供試劑和使用我們補充試劑的建議。 

CompTech EA 說明書

名稱:   EA(抗體致敏綿羊紅細胞) 

     EA (antibody-sensitized sheep erythrocytes)                 

目錄號:   B200 和B201 和B202           

可用尺寸: 5 mL , 10 mL和20 mL                

濃度:          5×10 8個細胞/ mL

吸光度:              412nm處 = 0.87以1/50稀釋在去離子水中

形式:                         液體 - 不要凍結

活性:                     補體CH50檢測功能齊全

緩沖區(qū):                       GVB ++ (CompTech#B100和B102)

防腐劑:             GVB ++含有0.025%sodium azide作為殺菌劑

儲存:                     + 4 o C 避免冷凍。冷凍裂解細胞。    

資源:                       正常 來自美國農(nóng)業(yè)部注冊設施的羊血。

產(chǎn)地:                       制造于美國。

 

一般描述

            涂有兔抗羊紅細胞抗血清(溶血素)的綿羊紅細胞傳統(tǒng)上用于測定血清樣品中補體經(jīng)典途徑的活性。  這些測定產(chǎn)生血清的CH50滴度(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。 

            在CH50測定(GVB ++)中使用的傳統(tǒng)緩沖液中以測定準備濃度提供EA 。  他們每周一早上準備新鮮,需要在 周五之前訂購,以便在下周接收。  它們在周一下午由隔夜快遞運送到周二(或大多數(shù)貨運的周三)。它們通??稍谥苽浜笫褂?周。他們被運往冷,但并不在室溫下長時間傷害(請注意,循環(huán)60-90天,37 Ø ç 體內(nèi))。它們應該一次每次使用前(在500 3分鐘,4?1000×g下進行洗滌ö C)和再懸浮       在GVB ++中的原始濃度 以減少背景。  該程序也可用于濃縮細胞。  這可以通過減少用于重懸細胞的體積來實現(xiàn)。

 

物理特征

            由于以下原因,EA由IgM抗體制成。  IgM在激活經(jīng)典途徑方面比IgG高約100倍,因為C1q必須與抗體上的至少兩個Fc結構域結合以進行激活。  因此,在敏感的測定中,已經(jīng)估計每個EA少至10個IgM可以引起裂解,而IgG裂解每個EA需要大約1000個IgG(Ross,GD(1986))。  這主要是因為在IgM中,在每個分子上的固定位置上存在五個緊密間隔的Fc結構域。  因為表面上IgG分子的間隔更隨機,所以在細胞表面上的正確位置發(fā)現(xiàn)2至5個IgG分子以結合并激活C1的可能性較小。

 

測定

            盡管CH50滴度被廣泛使用并且作為補體活性的主要臨床試驗,但CH50測定程序尚未*標準化。  在研究實驗室中,有與實驗室一樣多的程序,但所有程序基本相似并且給出有用的結果。  可根據(jù)要求從CompTech獲得詳細的逐步典型CH50滴定方法。  簡而言之,稀釋含有補體的血清樣品,使得測定中的終稀釋度為1/100至1/500。  對照包括兩個沒有0%裂解背景補體的試管和兩個試管,其中用水代替緩沖液進行100%裂解對照。  在濕冰上應設置分析管。  用GVB +使體積達到1.3mL或水),將管混合并加入0.2mL 5×10 8EA / mL的細胞并混合。  的反應,應溫育在37 60分鐘 ö ℃水浴含有大約10周分鐘的間隔再混合。  1小時后,將剩余的細胞離心(500-1000×g,3分鐘),并在1cm比色皿中在541nm處測定上清液的吸光度。  有多種數(shù)學方法可用于繪制結果圖。通過在對數(shù) - 對數(shù)圖上繪制x軸上的每個測定中使用的微升血清和y軸上的y /( 1-y),可以獲得幾乎的直線。  術語“y”是指裂解的細胞的比例,在0%裂解時為0,在30%裂解時為0.3,在50%裂解時為0.5,等等。  補體樣品的CH50值從該線在y軸上穿過1.0(50%裂解)獲得,并計算如下:CH50 = 1000除以血清的體積(以μL計),得到50%裂解。  例如,如果用5.6μL血清達到50%裂解,則CH 50 = 179單位/ mL。  應該注意的是,可以在應該是相同的樣品上獲得不同的CH 50值。  這是  CH50測定中涉及的大量變量的結果,包括在春季收獲的綿羊紅細胞比在秋季抽取的血液中的細胞更容易溶解,沒有兩個溶血素抗體很多是相同的,因為它們是由兔子等產(chǎn)生的抗血清制成的。

           

應用

            EA可用于確定血清的CH50溶血滴度,即CH50(參見上文的測定)。  它們可用于使用耗盡的血清滴定單個補體成分的功能活性。  它們也可用于制備攜帶活化的補體中間體的細胞(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。  將EA與C1溫育以制備(EAC1)或C1和C4(EAC14)。  可以將EAC14細胞與C2一起溫育以制備攜帶經(jīng)典途徑C3轉(zhuǎn)化酶的EAC142細胞,并且可以將EAC142與C3一起溫育以制備攜帶C5轉(zhuǎn)化酶的EAC1423細胞。  每種中間體可用于測定流體相組分的功能補體活性。  例如,EAC142細胞的裂解對低C3濃度極其敏感,并且即使在諸如血清的復雜混合物中,這也可用于滴定C3補體活性。

 

規(guī)    

            綿羊紅細胞(Es)用于人補體測定,部分是為了方便,但也因為它們?nèi)狈θ搜a體的膜結合調(diào)節(jié)劑。  對于人補體,在Es上不存在顯著水平的功能性DAF,CD59或CR1。  因此,Es對于它們?nèi)狈δふ{(diào)節(jié)活性是有用的。

 

參考

摩根,BP編輯。(2000)補充方法和協(xié)議。  Humana新聞。

 

Dodds,AW和Sim,RB編輯(1997年)。補充實用方法(ISBN 019963539)牛津 大學 按, 牛津。

 

Ross,GD(1986)補體系統(tǒng)的免疫生物學。(ISBN 0-12-5976402)奧蘭多學術出版社。

 

 

僅供研究使用。

不適合人類或藥物使用。

 

 

complementtech產(chǎn)品目錄:

 

貨號

品名

規(guī)格 

目錄價

品牌

A098

C1

200µg

3400

complementtech

A099

C1q

1000µg

3162

complementtech

A100

C1q (40% Glycerol)

1000µg

3162

complementtech

A102

C1r Enzyme

250µg

3417

complementtech

A103

C1s Proenzyme

250µg

3366

complementtech

A104

C1s Enzyme

250µg

3281

complementtech

A140

C1 Esterase Inhibitor

1000µg

3468

complementtech

A112

C2

50µg

3298

complementtech

A113

C3

250µg

2482

complementtech

A113c

C3 (concentrated)

1000µg

7327

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A114

C3b

250µg

3094

complementtech

A115

iC3b

250µg

3417

complementtech

A116

C3c

250µg

3706

complementtech

A117

C3d

100µg

3825

complementtech

A105

C4

250µg

3468

complementtech

A105c

C4 (concentrated)

1000µg

8245

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A108

C4b

250µg

2992

complementtech

A109

C4b Binding Protein

250µg

4131

complementtech

A120

C5

250µg

3570

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

詢價

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A122

C5b,6

50µg

3468

complementtech

A123

C6

250µg

3366

complementtech

A124

C7

250µg

3366

complementtech

A125

C8

250µg

3536

complementtech

A126

C9

250µg

3366

complementtech

A127

SC5b-9 Complex

100µg

2992

complementtech

A135

Factor B

250µg

3213

complementtech

A136

Factor D

25µg

3417

complementtech

A137

Factor H

250µg

2958

complementtech

A137c

Factor H (conc.)

10000µg

詢價

complementtech

A138

Factor I

100µg

3366

complementtech

A139

Factor P

100µg

3468

complementtech

A150

Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

1000µg

3298

complementtech

A154

Factor Ba

100µg

3298

complementtech

A155

Factor Bb

250µg

6188

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

詢價

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A300

C1q-Dpl

1ml

2074

complementtech

A312

C2-Dpl

1ml

2074

complementtech

A314

C3-Dpl

1ml

2482

complementtech

A305

C4-Deficient Guinea Pig

1ml

2448

complementtech

A308

C4-Dpl           

1ml

2482

complementtech

A320

C5-Dpl

1ml

2125

complementtech

A323

C6-Dpl

1ml

2040

complementtech

A324

C7-Dpl

1ml

2074

complementtech

A325

C8-Dpl

1ml

2074

complementtech

A326

C9-Dpl

1ml

2074

complementtech

A335

Factor B-Dpl

1ml

2074

complementtech

A336

Factor D-Dpl   

1ml

2074

complementtech

A337

Factor H-Dpl

1ml

2686

complementtech

A338

Factor I-Dpl    

1ml

2482

complementtech

A339

Factor P-Dpl

1ml

2482

complementtech

A340

C3/C4 Inactivated Serum

1ml

2074

complementtech

A399

C1q/Factor D-Dpl  

1ml

2856

complementtech

A200

Goat Anti-Human C1q     

1ml

1054

complementtech

A212

Goat Anti-Human C2

1ml

2329

complementtech

A213

Goat Anti-Human C3

1ml

1054

complementtech

A218

Rabbit Anti-Human C3a

1ml

2550

complementtech

A205

Goat Anti-Human C4

1ml

1054

complementtech

A206

Rabbit Anti-Human C4a

1ml

2550

complementtech

A220

Goat Anti-Human C5

1ml

1275

complementtech

A221

Rabbit Anti-Human rC

1ml

2550

complementtech

A223

Goat Anti-Human C6

1ml

1275

complementtech

A224

Goat Anti-Human C7

1ml

1275

complementtech

A225

Goat Anti-Human C8

1ml

1275

complementtech

A226

Goat Anti-Human C9

1ml

1275

complementtech

A227

Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

0.2ml

2584

complementtech

A235

Goat Anti-Human Factor B

1ml

1275

complementtech

A236

Goat Anti-Human Factor D

1ml

2499

complementtech

A237

Goat Anti-Human Factor H

1ml

1275

complementtech

A238

Goat Anti-Human Factor I

1ml

1309

complementtech

A239

Goat Anti-Human Factor P

1ml

1462

complementtech

A240

Goat Anti-Human C1-INH        

1ml

1173

complementtech

A260

Rabbit Anti-Human Vitronectin

1ml

1445

complementtech

NHS

Human Serum

1ml

578

complementtech

GPS

Guinea Pig Serum

1ml

714

complementtech

NRS

Rat Serum

1ml

901

complementtech

NMS

Mouse Serum   

1ml

1309

complementtech

B102

GVB++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B100

GVB++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B103

GVB° (without Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B101

GVB° (without Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B104

GVBE (with EDTA)

250ml

1224

complementtech

B105

GVBE (with EDTA)

1 Liter

3264

complementtech

B110

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

250ml

1870

complementtech

B111

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

1 Liter

5066

complementtech

B112

VBS++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B113

VBS++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B200

EA (Ab-sensitized sheep E)

5ml @ 5x108/ml

3043

complementtech

B201

EA (Ab-sensitized sheep E)

10ml @ 5x108/ml

4556

complementtech

B202

EA (Ab-sensitized sheep E)

20ml @ 5x108/ml

6324

complementtech

B210

Es (sheep E)

20ml @ 5x108/ml

2652

complementtech

B300

Er (rabbit E)

5ml @ 5x108/ml

1649

complementtech

B301

Er (rabbit E)

10ml @ 5x108/ml

2652

complementtech

B302

Er (rabbit E)

20ml @ 5x108/ml

3893

complementtech

B400

Zymosan (preactivated)

10ml @ 1x109/ml

2261

complementtech

B106

MgEGTA

10ml @ 0.1M

1139

complementtech

B250

MCAR

1.0 ml

2482

complementtech

Hemolysin

Hemolysin  NEW

2.0 ml

2040

complementtech

 

 

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2:產(chǎn)品種類齊全,經(jīng)營超過700多個品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

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